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紫外吸收法測定蛋白質濃度的基本原理及優缺點

 更新時間:2022-06-29 點擊量:12176

原理:蛋白質分子中常含有酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等苯環結構,在紫外280nm波長處有最大吸收峰,其光吸收值與蛋白質濃度成正比,故可以用280nm波長吸收值大小來測定蛋白質含量。
優點:
1.快速;
2.對蛋白質無破壞性。
缺點:
1.不是嚴格的定量方法。因為此法是根據酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)殘基的強吸收值來測定的,不同的蛋白質具有不同的消光系數。另外,當蛋白質分子中不含Tyr、Phe或Trp殘基時,該方法就不能檢出蛋白。(此法用于測粗提總蛋白濃度較為適宜)
2.核酸可引起強烈干擾。


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